Café (Coffea arabica): La crespera del café es una enfermedad asociada a X. fastidiosa. Las plantas con crespera presentan pérdida de foliolos, hojas pequeñas con clorosis, enrollamiento de los bordes y un bajo rendimiento (Fournier-Zumbado, 2007) (figura 1). En el año 2007 se publicó el primer reporte de X. fastidiosa (subsp. pauca) en plantaciones de café del Valle Central que presentaban síntomas leves (Garita et al., 2021). Según reportes recientes, los saltamontes dentro de los géneros Graphocephala, Erythrogonia y Kapateira, provenientes de una plantación cafetalera de Alajuela, fueron confirmados como agentes transmisores (Garita et al., 2021).

Figura 1 Fuente: Fotografía tomada por Laura Garita en la provincia de San José, 2022.

Naranjo (Citrus sinensis): En 2005, X. fastidiosa fue reportada en muestras de árboles de naranjo que se encontraban dentro de plantaciones cafetaleras. Los árboles presentaban clorosis foliar y muerte regresiva, así como frutos duros y pequeños. Estos síntomas eran similares a los causados por la CVC, una destructiva enfermedad inducida por X. fastidiosa. Análisis posteriores confirmaron la presencia del patógeno. Los vectores más comunes de la CVC incluyen varias especies de hemípteros, como cicadélidos (Hemiptera: Cicadellidae) y cercopoideos (Hemipera: Cercopoidea) (Artavia Pereira y Calvo-Villalobos, 2021).

Aguacate (Persea americana): El primer reporte de X. fastidiosa infectando árboles de aguacate en el país data del año 2007. La sintomatología es heterogénea, solo algunas ramas presentan quemaduras y deformación de hojas, mientras otras parecen sanas (Montero-Astúa et al., 2007). Las muestras se recolectaron de árboles en San José y Alajuela. Hasta la fecha el conocimiento sobre la diversidad de cepas y los vectores en plantaciones de aguacate es escaso (Geering y Parkinson, 2019).

Cultivos ornamentales: En Costa Rica, arbustos de adelfa o laurel rosa (Nerium oleander) con quemaduras, defoliación y marchitez fueron muestreados en el Valle Central y en ellos se confirmó la presencia de X. fastidiosa (Montero-Astúa et al., 2007). El caso de la palmera fénix (Phoenix roebelenii) es de particular interés en Costa Rica. Se cultiva en el norte del país, cerca de zonas cafetaleras y con siembra de cítricos (Jeger et al., 2016); y si bien la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA) decidió incluirla en la lista de plantas prohibidas para su importación desde ciertos países, aún se debate si realmente P. roebelenii está infectada con la bacteria en territorio costarricense (Villegas-Rojas, 2016). En la siguiente sección se profundizará en los impactos que esto ha ocasionado al país.

Uno de los pilares económicos de Costa Rica es la agricultura. La infección grave de X. fastidiosa en cafetos reduce drásticamente la producción de frutos e incrementa los costos de renovación en las fincas (Galvis-García, 2006; Vargas-Cartagena, 2020). Durante 2014, en ejemplares de C. arabica exportados desde Costa Rica hacia Holanda se diagnosticó la subespecie pauca. Tanto las plantas como sus consignaciones fueron destruidas (Bergsma-Vlami, 2015). El muestreo fue parte de las inspecciones anuales que ha implementado la Unión Europea (UE) para evitar el ingreso de X. fastidiosa en su territorio, luego del dañino brote ocurrido en árboles de olivo (Olea europaea) en Italia, el año 2013 (Rapicavoli et al., 2017).

Se sugiere que la subespecie pauca fue introducida a Italia desde Centroamérica, posiblemente desde Costa Rica, debido a la similitud genética entre aislamientos de café ornamental del país centroamericano y aislamientos de los olivos infectados de Italia (Nunney et al., 2014; Sicard et al., 2018). La evidencia molecular indica que la cepa pudo haber llegado incluso mucho antes, en 2008; luego habría ido adaptándose y estableciéndose progresivamente para colonizar plantaciones de olivo en su nuevo ambiente (Nunney et al., 2014).

Como consecuencia de las restricciones que tomó la UE, el gobierno de Costa Rica declaró emergencia fitosanitaria nacional en agosto de 2015 mediante el decreto N° 39058-MAG (Villegas-Rojas, 2016). Esto implicó una alta inversión de dinero y esfuerzos en análisis de diagnóstico en el extranjero, identificación de vectores, tratamientos y capacitaciones, junto con el cierre de mercados a los que se exportaban más de 100 especies de plantas ornamentales; cabe destacar que las actividades económicas de este sector proveen alrededor de 600 empleos directos (SFE, 2015; Villegas-Rojas, 2016). El cultivo más afectado fue la palmera fénix: pese a ser la principal planta ornamental comercializada desde Costa Rica a la UE, en 2015 se restringió su venta; así que en 2016 el país envió un informe con petición para la reapertura del mercado europeo. Este mismo fue rechazado por falta de información contundente que confirmara el estado de no hospedante de la bacteria (Jeger et al., 2016). Solo para 2017 más de 1000 personas, entre ellas palmicultores, habían perdido sus empleos o inversiones (POnTE, 2017).

Hasta febrero de 2022 la UE reanudó la exportación de plantas ornamentales afectadas por la medida fitosanitaria en Costa Rica. La empresa Innovaplant, ubicada en Sarchí Norte de Alajuela, fue declarada sitio libre de X. fastidiosa gracias a sus efectivas medidas de bioseguridad y su nivel tecnológico (SFE, 2022). Para que este escenario fuera posible se llevó a cabo una rigurosa serie de buenas prácticas agrícolas que incluyeron la agricultura de precisión, el uso de herramientas tecnológicas como la georreferenciación, la aplicación de cercas digitales, la caracterización de vectores, tratamientos y capacitación del personal (SFE, 2015).

Se espera que en el futuro otras empresas cumplan con los requisitos de la normativa europea, para así reanudar el comercio de plantas ornamentales, especialmente en fincas de zonas rurales donde el combate de este patógeno se dificulta debido a la inversión económica que se requiere para implementar un programa de manejo integrado.

Una gran parte de los proyectos de investigación que se están desarrollando en el país es llevada a cabo por la Universidad de Costa Rica (UCR) en colaboración con otras instituciones. Por ejemplo, el Centro de Investigación en Biología Celular y Molecular (CIBCM) de la UCR, en conjunto con el MAG, ha aumentado esfuerzos para estudiar la ecología de esta bacteria. En este sentido, los investigadores Laura Garita y Mauricio Montero Astúa se han enfocado en estudiar la interacción de X. fastidiosa con otros organismos tales como vectores, virus y otras bacterias (figura 2).

En el CIBCM se ha realizado investigación con X. fastidiosa en varios proyectos, por ejemplo: Estudio de la Diversidad Genética de la Fitobacteria Xylella fastidiosa Presente en Diferentes Especies de Plantas en Costa Rica: Un Paso Hacia su Origen Geográfico (B 2516); Xylella fastidiosa en Nerium oleander y Macadamia spp., Caracterización de Aislamientos de Costa Rica (B 5123) -que permitió el primer reporte de esta bacteria en adelfas del país mediante técnicas moleculares-; Aislamiento de Xylella fastidiosa de Hospederas Alternas en Plantaciones de Café y Vid Afectadas por esta Bacteria (B 0502) -donde se logró comprobar utilizando cultivo in vitro y técnicas moleculares la presencia de X. fastidiosa en uva y cafetos del país (figura 3)-; Desenmascarando a Transmisores del Fitopatógeno Xylella fastidiosa en Café (Coffea sp.) en Costa Rica -proyecto realizado con el objetivo de identificar especies pertenecientes a las familias Cicadellidae y Cercopidae que juegan

Figura 2 Nota: Se muestran los hospedantes susceptibles a la infección con X. fastidiosa, así como algunas condiciones favorables para su desarrollo. Fuente: Elaboración propia, 2023.

un papel en la transmisión del fitopatógeno X. fastidiosa en plantaciones de café de Costa Rica- (Gatgens, 2021). Además, el MAG, en conjunto con el Servicio Fitosanitario del Estado (SFE), cuenta con un proyecto que se basa en analizar molecularmente muestras de plantas que presentan los síntomas para confirmar o refutar la infección por X. fastidiosa; esto con el fin de extender el mapeo de aquellas plantaciones en las cuales se da la presencia de esta bacteria. Actualmente cuentan con más de 10 fincas debidamente identificadas y muestreadas a lo largo de todo el territorio costarricense, para estudiar la ecología en torno a X. fastidiosa.

Figura 3 Fuente: Fotografía tomada por Luis Navarro, 2023.

Además del MAG, la Facultad de Microbiología (FMic) de la UCR también trabaja en colaboración con el CIBCM. El aporte de esta facultad es liderado por Carlos Chacón y su equipo de trabajo, y la colaboración entre el CIBCM y la FMic se ha establecido principalmente con el fin de estudiar toda la información genética y molecular de la bacteria y sus subespecies. Por su parte, la Escuela de Biología (EB) de la UCR también ha extendido su apoyo mediante estudiantes de posgrado, principalmente para estudiar y analizar a los insectos que transmiten las enfermedades y su taxonomía.

Además, el Instituto Tecnológico de Costa Rica (TEC) y el Instituto del Café de Costa Rica (Icafe) participaron en una investigación para identificar microorganismos endógenos en cicadélidos y endófitos asociados a la crespera del café en el Valle Central costarricense, con el objetivo de determinar su relación con la sintomatología de la crespera. Este análisis, llevado a cabo en 2008, presentó nuevos datos acerca de los procedimientos de aislamiento, medios de cultivo y métodos moleculares que posibilitan la detección de endófitos y patógenos en plantas. Estos descubrimientos podrían utilizarse en investigaciones posteriores para establecer barreras de entrada y control biológico contra X. fastidiosa (Chacón, 2008).

Adicionalmente, el CIBCM y el CIET de la UCR trabajan en colaboración con la UE y las autoridades de países como Italia, para informarles acerca de la ecología de la bacteria, las enfermedades y sus respectivos síntomas en los cultivos tropicales (figura 4). Este proyecto lleva por nombre “BeXyl: Beyond Xylella” y reúne a personas científicas e interesadas en desarrollar nuevas estrategias que mitiguen el impacto de los brotes de X. fastidiosa en la UE. Su línea de estudio abarca variedades de plantas resistentes, nuevos sistemas de detección y vigilancia del patógeno, tratamientos con microbioma vegetal y factores impulsores de epidemias causadas por esta bacteria, considerando el cambio climático (BeXyl Project, 2023). Uno de los proyectos de investigación en BeXyl es la resistencia a insecticidas del vector de X. fastidiosa, el H. vitripennis, a través de dos enfoques: en primer lugar, la secuenciación del ARN de especímenes resistentes y susceptibles al insecticida capturados en la naturaleza, con el fin de entender su transcriptoma; en segundo lugar, la caracterización del microbioma y micobioma de este vector para explorar correlaciones con su nivel de resistencia a los insecticidas. También se estudian los mecanismos genéticos que llevan a la resistencia a X. fastidiosa, así como la exploración de compuestos innovadores y formulaciones que reduzcan la propagación de esta bacteria dentro de las plantas (BeXyl Project, 2023). Esta colaboración es de relevancia porque X. fastidiosa, al ser una bacteria endémica de América, es aún menos estudiada y, por ende, más devastadora en Europa. A nivel internacional también es importante la colaboración entre el CIBCM y la Universidad de Berkeley, California, mediante el investigador Rodrigo Almeida y sus estudiantes, para estudiar aspectos ecológicos de esta bacteria en diversos hábitats a lo largo del continente americano. Los resultados de estas investigaciones aún se encuentran en vías de desarrollo, pero permitirán proponer y probar soluciones prácticas a los brotes de X. fastidiosa en el mundo.

Figura 4 Nota: El CIBCM estudia en sus invernaderos las enfermedades y síntomas que causa X. fastidiosa en cultivos tropicales. Fuente: Fotografía tomada por Luis Navarro, 2023.

El CIBCM, en conjunto con la FMic, planea extender la invitación para cualquier costarricense a formar parte de una investigación sobre X. fastidiosa. En síntesis, este proyecto tiene como propósito obtener datos que permitan establecer las zonas geográficas del territorio costarricense donde se encuentra presente la bacteria. La recolección de muestras se realizará publicando información divulgativa en la que se muestre una breve introducción a la bacteria, así como fotografías de los síntomas en las plantas centinelas, y las indicaciones para la preparación de las muestras. De este modo, cualquier persona que vea dicha información y considere tener a su cuidado alguna planta que presente esos síntomas (entre las que se incluyen mango, café, uva, aguacate, níspero, durazno, naranja y guayaba) será capaz de enviar una muestra al CIBCM, para estudiar toda la información genética y detectar la presencia de X. fastidiosa en organismos o sitios no reportados anteriormente. Aquellas muestras que den positivo a la presencia de esta bacteria se irán agregando a una base de datos en tiempo real que despliegue la información en un mapa digital de Costa Rica, con el fin de analizar si es una bacteria que se encuentra en todo el territorio costarricense o solamente en zonas alejadas por razones biológicas y ecológicas. Este es un proyecto que se encuentra en su etapa inicial, así que obtener resultados amplios e informativos depende en gran medida de cuánto la población lo divulgue y colabore.